4）证明衔接分子与自噬的相关性（说明该分子在衔接自噬和表型中的作用机制）。

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　　2）小自噬◆◆★：也发生相同的包绕过程，但包绕底物的是自身发生内陷的溶酶体膜◆★■■。

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　　1）经典自噬★◆■：也称大自噬★◆◆，由脂质膜结构包绕带降解物形成自噬体，然后与溶酶体融合并降解其内容物的过程。

　　根据底物进入溶酶体途径的不同★■，可将自噬分为大自噬、小自噬和分子伴侣介导的自噬（CMA）◆■★◆■■。

　　检测自噬水平的方法主要有三种◆■★■◆◆：电镜观察、Western Blot 检测和荧光蛋白标记检测。

　　3）CMA：是指胞质内蛋白结合到分子伴侣后被转运到溶酶体腔中并消化的过程。CMA 在清除蛋白质是有选择性，底物为可溶的蛋白分子。

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　　1）证明自噬所参与的研究表型（电镜★■◆、LC3 I/I WB、LC3 亚细胞定位、LC3 双荧光测细胞自噬流）；

　　目前自噬研究的热度居高不下，成为国自然的「常客」。据统计■■，在 2023 年自噬研究荣登国项目资助总净额达 3 亿 +◆■。面对当前的「风口」，我们又该瞄准哪些方向◆◆？

　　2）荧光蛋白标记检测包括单荧光质粒检测■■★，即检测 GFP-LC3★■■；穿梭质粒检测◆◆，即通过自噬溶酶体的酸碱度改变导致的 GFP 淬灭来观察。

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　　3）寻找表型与自噬的衔接分子（检测 PI3K 通路、Beclin-1、ATG 家族各成员）；

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